每種物質(zhì)就有固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)原理定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
以下是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的原理和基本操作步驟:
原理:
1.根據(jù)比爾定律,溶液中物質(zhì)的吸光度與其濃度成正比,可用來(lái)定量分析。
2.光通過(guò)樣品時(shí),被樣品吸收的光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度之比即為吸光度。
操作步驟:
1.打開(kāi)電源,并預(yù)熱一段時(shí)間以穩(wěn)定儀器性能。
2.調(diào)節(jié)波長(zhǎng)選擇旋鈕,選擇所需的測(cè)試波長(zhǎng)(紫外或可見(jiàn)光范圍)。
3.使用空白試劑(溶劑)校準(zhǔn)儀器,將空白試劑置于樣品室中,調(diào)零吸光度。
4.取待測(cè)溶液樣品,將其置于樣品室中,關(guān)閉樣品室,記錄吸光度讀數(shù)。
5.如果需要測(cè)定多個(gè)波長(zhǎng)下的吸光度,依次調(diào)節(jié)波長(zhǎng)選擇旋鈕進(jìn)行測(cè)量。
6.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,可以繪制吸光度與波長(zhǎng)的曲線,進(jìn)行定量或定性分析。
7.測(cè)量結(jié)束后,清潔樣品室和光學(xué)元件,關(guān)閉儀器并保存數(shù)據(jù)。
注意:在操作紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí),應(yīng)注意避免樣品污染、保持儀器清潔,并按照儀器說(shuō)明書和操作手冊(cè)進(jìn)行操作。